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四种肝病相关自身抗体联合检测在肝功能异常血清中的临床价值

[07-22 00:49:02]   来源:http://www.dxs56.com  医学论文   阅读:8229
概要:[摘要] 目的 探讨 4 种肝病相关自身抗体在肝功能异常患者血清中的阳性率及其诊断价值。 方法间接免疫荧光法检测血清中 ANA、SMA、AMA、抗 LKM-Ⅰ,根据荧光反应强弱判定结果。 结果 150 例肝功异常患者(ALT>50U/L)自身抗体阳性率为 18.7%(28/150),其中抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)及抗线粒体抗体(AMA)的阳性率分别为 12.7%(19/150)、6.7%(10)/150)和 7.3%(11/150);未检出抗肝肾微粒体Ⅰ型抗体(LKM-Ⅰ);女性患者自身抗体的检出率明显高于男性患者(P<0.05);病毒性肝炎标志物阴性组自身抗体检出率明显高于阳性组(P<0.05)。 结论 自身抗体对自身免疫性肝病在诊断疾病、了解病程和观察疗效中具有很重要的价值,肝功能异常的非病毒性肝炎病人适合进行肝病相关自身抗体的检测。自身免疫性肝脏疾病是一组病因及发病机理尚不完全清楚但与自身免疫相关的一组疾病,包括自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBC)和原发性硬化性胆管炎(PSC)[1~3]。 某些自身抗体由于
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  [摘要] 目的 探讨 4 种肝病相关自身抗体在肝功能异常患者血清中的阳性率及其诊断价值。 方法间接免疫荧光法检测血清中 ANA、SMA、AMA、抗 LKM-Ⅰ,根据荧光反应强弱判定结果。 结果 150 例肝功异常患者(ALT>50U/L)自身抗体阳性率为 18.7%(28/150),其中抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)及抗线粒体抗体(AMA)的阳性率分别为 12.7%(19/150)、6.7%(10)/150)和 7.3%(11/150);未检出抗肝肾微粒体Ⅰ型抗体(LKM-Ⅰ);女性患者自身抗体的检出率明显高于男性患者(P<0.05);病毒性肝炎标志物阴性组自身抗体检出率明显高于阳性组(P<0.05)。 结论 自身抗体对自身免疫性肝病在诊断疾病、了解病程和观察疗效中具有很重要的价值,肝功能异常的非病毒性肝炎病人适合进行肝病相关自身抗体的检测。

  自身免疫性肝脏疾病是一组病因及发病机理尚不完全清楚但与自身免疫相关的一组疾病,包括自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBC)和原发性硬化性胆管炎(PSC)[1~3]。 某些自身抗体由于缺乏疾病特异性,不仅见于自身免疫性疾病,也出现于病毒性肝炎或其他免疫介导的疾病当中[4,5]。 为了探讨包括抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗肝肾微粒体Ⅰ型抗体(LKM-Ⅰ)、抗线粒体抗体(AMA)等自身抗体在肝病患者中检出的阳性率和意义,本文收集 150 例肝功能明显异常的各种肝病患者,检测血清中上述几种自身抗体,现报道如下。

  临床资料和方法

  1 一般资料 选择 20xx 年 3 月~20xx 年 2 月来本院就诊的 150 例肝功能明显异常的各种肝病患者,男性 87 例,女性 63 例,年龄 43±14.1 岁(20~71岁)。 150 例中,确诊为病毒性肝炎的 80 例,包括乙肝 56 例、丙肝 20 例、甲肝 4 例;胆石症、酒精肝和肝豆状核变性各 1 例;其余 67 例为不明原因的肝功能异常者。 同时收集 30 例健康体检者作为对照组,年龄 44±13.7 岁(21~75 岁)。2 方法 所有对象均于清晨空腹抽取静脉血3ml,分离血清,以 ELISA 法作病毒性肝炎血清标志物检测,同时以间接免疫荧光法检测血清中的相关自身抗体,包括 ANA、SMA、LKM-Ⅰ及 AMA。 试剂来源于德国欧蒙免疫试剂公同。 血清检测时主要采用 Hep-2 细胞、猴肝、鼠肝、鼠肾、心肌和胃组织冰冻切片作为抗原 www.dxs56.com www.dxs56.com,采用生物薄片赛克技术将带有组织细胞的 6 种切片组成一个反应区,4℃保存备用。将待检血清 1:100 稀释后与组织细胞孵育 30min,后加入荧光素标记的抗人免疫球蛋白结合 30min,经洗涤、 封片后荧光显微镜观察结果;ELISA 法检测抗-HAV-IgM、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HB-cAb 及抗-HCV 抗体和抗-HEV-IgM/IgG 等, 其中抗-HAV IgM 试剂盒购于上海科华生物工程实业有限公司,HBV 试剂盒购于广州中山生物技术有限公司,抗-HCV 抗体和抗-HEV IgM/IgG 购自北京现代高达生物工程有限公司。3 结果判定 在同一张切件中根据荧光模式特点可同时判定出下列几项自身抗体:ANA、AMA、SMA、LKM 和抗心肌抗体(ASA)。 血清稀释度>1:100时组织细胞内出现特异性绿色荧光判为阳性,未见荧光反应者为阴性。4 统计学处理 采用 SPSS 12.0 软件处理,计数资料用 χ2检验。

  结 果

  1 自身抗体的阳性检出率 150 例感者中,28 例(18.7%) 出现 1 项或>1 项自身抗体阳性:ANA (+)8例、且 AMA(+)8 例、单纯 AMA(+)3 例、ANA(+)且SMA(+)4 例,单纯 SMA(+)6 例、单纯 ANA(+)7 例,明显高于对照组的检出率;未检出 LKM-Ⅰ。2 患着性别与自身抗体检出率的关系见表 1。3 病毒性肝炎标志物与自身抗体检出率的关系肝炎病毒标志物包括抗-HAV IgM、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb 及抗-HCV 和抗-HEV IgM/IgG。 病毒性肝炎标志物阳性转阴性者,其自身抗体检出率的差别具有统计学意义(表 2,P<0.05)。 www.dxs56.com

  讨 论

  虽然自身抗体在自身免疫性肝炎发病机制中的确切作用尚未得以证实,但其在诊断疾病、了解病程和观察疗效中有很重要的价值。 目前已发现与自身免疫性肝炎有关的自身抗体包括 ANA、SMA、 抗骨架蛋白抗体、抗肌蛋白抗体、LKM 和 AMA 等,其中常用的有 ANA、SMA、LKM、AMA 和可溶性肝抗原抗体等,依据这些抗体,不仅可以实现对自身免疫性肝炎的诊断,还可将其分型[6]。自身免疫性肝炎的发病机制有别于病毒性肝炎,二者的治疗方案也截然不同,前者以免疫抑制疗法为主,后者则采用抗病毒治疗。 有文献报道,血清中 HCV 及 HDV 抗体阳性的患者可产生自身抗体[7],本实验表明,肝炎病毒标志物阳性的患者,其自身抗体阳性率远低于阴性者, 与文献报道一致。因此,对于病毒性肝炎标志物和自身抗体同时阳性的患者需谨慎确定治疗方案[8~10]。自身抗体的检出率有明显的性别倾向,女性高于男性,符合自身免疫性疾病多见于女性的特点点。生物玛赛克技术可将多种组织细胞抗原基质集中在一张玻片上,一次反应检测多种抗体,具有省时、方便的优点,适合于临床实验室应用;但是如何排除非特异因素的干扰,准确识别抗体特异的荧光模式是保证实验结果可靠的重要因素,实验室应加强这方面的训练及标准化工作以保证实验结果的可靠。

  参 考 文 献

  [1] Joshi S, Cauch-Dudek K, Heathcote EJ, et al. Antimitochondrialantibody profiles: are they valid prognostic indicators in primary bil-iary cirrhosis[J]? Am J Gastroenterol, 20xx,97:999~1000. www.dxs56.com

  [2] 王宇明,毛 青,陈 嵩,等.原发性胆汁性肝硬化和自身免疫性肝炎重叠综合征的临床与病理分析[J].中华肝脏病杂志, 20xx,13:6~8.

  [3] Feld JJ, Heathcote EJ. Epidemiolgy of autoimmune liver disease[J]. JGastroenterol Hepatol, 20xx,18:1118~1128.

  [4] McFarlane IC. Lesson about antiboides in autoimmune hepatitis[

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